猪支原体肺炎血清学检测技术及其应用
猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的猪的一种高发病率低死亡率的慢性呼吸道传染病,国外常称为猪地方流行性肺炎,而在我国常被称为猪气喘病(喘气病)。研究表明，全世界90%以上的猪群感染了肺炎支原体使猪支原体肺炎成为流行最广损失最大的猪病之一。即使在低水平感染状态下猪支原体肺炎可使饲料报酬降低，胴体质量下降并增加治疗费用从而使养猪成本显著增加。
母婴垂直传播是猪支原体肺炎在许多猪场得以存在的基础。一旦少数猪发生感染，同群其他猪就容易发生感染，猪群密度较大时尤其是这样。尽管一般认为肺炎支原体感染从保育猪开始但却没有从保育猪肺中分离到肺炎支原体。支原体肺炎在生长育肥猪中的发生率高，其原因包括肺炎支原体的潜伏期长、窝内传播缓慢、保育后期猪的密度增加及其他传染源和环境因素的传播等。目前，猪支原体肺炎控制措施主要包括给药和疫苗预防血清学监测和加强饲养管理。
用于猪支原体肺炎的诊断方法很多，包括临床和组织病理学检查、病原检测技术和血清学检测技术等。临床和组织病理学检查对临床症状和病变明显的病猪具有一定的诊断意义，但对症状和病变不明显的慢性感染猪效果不大。PCR技术等病原学诊断技术虽然具有可以确诊敏感性和特异性高等特点，但其需要的设备和技术要求都比较高，费用也不低。因此，目前主要用于实验室研究和SPF猪群的诊断血清学检测技术具有操作简便、快速、易于标准化等优点，适于在临床中应用，是猪支原体肺炎控制的重要手段之一。
1常用的血清学试验及其比较
1.1间接血凝试验
间接血凝试验具有一定的特异性和敏感性，是诊断猪支原体肺炎常用方法之一。用间接血凝试验来检测猪肺炎支原体抗体，但发现感染猪的血清能使绵羊红细胞自然溶血。可以用猪红细胞代替绵羊红细胞,虽然在实验中不易发生溶血现象但猪红细胞的效价低于绵羊红细胞。由于血清中含有易溶血的特异性吸附因子，制备的红细胞存在个体差异不易标准化，使间接血凝试验在临床应用中受到了一定的限制。
1.2补体结合试验
补体结合试验也是一种可检测猪血清中肺炎支原体抗体的血清学试验。在实验接种猪和自然感染猪中，补体结合试验的阳性率虽与猪肺部病变有较好的相关性，但假阳性和假阴性仍偏高。假阴性反应是由于循环抗原的影响而假阳性反应是由于感染了其他支原体出现交叉反应。CFT在敏感性和特异性方面存在一定的局限,需综合运用临诊和病理显微检查来判断猪肺炎支原体的感染状况。
1.3酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前国内外最常用于诊断肺炎支原体的方法之一,具有能进行定量分析、敏感性高、特异性强的特点。
单抗阻断ELISA，此法可从单抗水平上诊断肺炎支原体抗体,而且不需完全纯化抗原,用此法检测接种猪鼻支原体和絮状支原体的SPF猪和感染猪的血清发现与絮状支原体和猪鼻支原体无交叉反应，ELISA在敏感性和特异性方面优于IHA而单克隆抗体阻断ELISA比间接ELISA检出抗体时间早(接种后2周)持续时间更长(至少20周内抗40ku抗原抗体仍是主要抗体,而其他方法中的抗体从13周便开始下降)单克隆抗体阻断ELISA很适于在建立SPF猪群时检测肺炎支原体抗体另外,ELISA也适合通过检测初乳监测肺炎支原体感染。
2血清学监测在猪支原体肺炎控制中的应用
补体结合试验在接种后3周可检测到相应抗体,自然感染5周后可检测到相应抗体；ELISA方法在接种和自然感染后2周可检测到相应的抗体。在猪感染后3-5周ELISA的检测敏感性高于补体结合试验，在感染后6-7周两种方法效果相近。然而，用ELISA方法可检测到接种1年后的抗体，而补体结合试验在接种后大约5个月就检测不到抗体。
通过对自然感染猪血清抗体监测发现，间接血凝试验相对不敏感，最不适合于临床应用，补体结合试验在早期检测肺炎支原体抗体比较敏感,但对后期抗体检测不敏感ELISA是最敏感的方法测定的抗体效价比用补体结合试验和间接血凝试验高10-32倍，而且在后期检测中ELISA法的效价仍然很高所以ELISA最适合用于猪肺炎支原体感染的血清学监测。
2.1阴性猪群中血清学监测的应用
在养猪生产中，控制任何呼吸道综合征病原的第一个步骤是定义潜在致病原的角色，其中确定上呼吸道病毒或细菌显得特别重要，因为这些病原能为其他继发致病原打开门户，从而在整个猪群中形成一种潜在的毁灭性疾病。
在无肺炎支原体的某个养猪场或地区，我们应该对新引入的猪群和原有猪群进行连续筛选检测。该检测方法应该非常敏感、可信度高，不会出现假阴性结果；对于阳性检测结果，我们应该用一种更特异性的方法进行确认。该策略可为猪场的支原体控制计划提供早期感染的可靠预警。
2.2阳性猪群中血清学监测的应用
控制阳性猪群中猪肺炎支原体感染仍然需要一种非常敏感的血清学检测方法要想使ELISA作为一种有效的群体监测工具，需要系统地采集不同年龄段、有效数量的猪样品进行检测。制定的科学准则选择正确的采样计划这样兽医就可以依赖获得的结果采取相应的措施如猪群健康管理和疫苗的应用等。
母源抗体干扰是影响猪支原体疫苗的免疫效果的一个重要机制，疫苗免疫后缺乏相应抗体的一个重要原因是母源抗体干扰现象。因而，在对仔猪进行免疫前先确定母源抗体消退率的基准线，使兽医能更恰当地选择首次免疫的日龄。
中心分布
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