专业治疗白癜风的医院 https://wapjbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/从武汉肺炎爆发以来，翊圣生物积极参与其中，基于长期储备的分子酶双向改造、蛋白发酵纯化和高效抗体筛选技术平台，翊圣生物已储备有多万份新型冠状病毒检测试剂盒酶原料，可日组装40万次新型冠状病毒核酸检测试剂盒！现在我们总结武汉肺炎诊断试剂盒（RT-PCR法）中的核心原料的开发策略，供读者参阅。
一、开发目的
利用中国CDC和WHO指导文件中相关基因的引物和探针，依次验证质粒标准品、假病毒标准品，筛选出适合新冠病毒的RNA扩增试剂。
二、开发策略
1.模拟测试质粒标准品样本将检测灵敏度和特异性作为RT-PCR探针法检测试剂的核心指标，筛选出了灵敏度至少达到10copies(20μL反应体系)，高特异性判别新冠病毒ORF1ab、Ngene和Egene的候选配方。
图1.以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene质粒为模板，模板投入量-拷贝数，采用CDC建议引物和探针，进行单管多重扩增检测。在此过程中，根据引物和探针属性，优化扩增程序。
图2.以SARS-CoV-2ORF1ab质粒，EgenePCR产物为模板，模板投入量-拷贝数，采用WHO建议引物和探针，进行单管多重扩增检测。在此过程中，根据引物和探针属性，优化扩增程序。2.模拟测试假病毒标准品样本模拟新冠病毒样本核酸提取到扩增全流程，筛选出了假病毒样本灵敏度至少达到copies/mL(25μL反应体系)的配方。图3.以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene假病毒为模板，模板投入量-copies/mL，采用中国CDC建议引物和探针，进行单管多重扩增检测。
3.试剂稳定性测试
将试剂保存条件的容忍度和批次稳定性作为试剂稳定性的评估指标，测定该配方批次间和批次内CV值＜5%，可反复冻融次数50次，4℃，25℃保存一周，性能无变化，保证了质量稳定可靠。
图4.生产批次：H。以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene假病毒为模板，模板投入量-copies/mL，进行单管多重扩增检测，比较Ct值和扩增曲线线型。
图5.生产批次：H、H、H。以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene假病毒为模板，模板投入量-copies/mL，进行单管多重扩增检测，比较Ct值和扩增曲线线型。
图6.以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene假病毒为模板，模板投入量-copies/mL，进行单管多重扩增检测，比较4℃、37℃保存1天、3天、5天和7天后Ct值和扩增曲线线型。
图7.以SARS-CoV-2ORF1ab和Ngene假病毒为模板，模板投入量-copies/mL，进行单管多重扩增检测，比较反复冻融30次和50次处理后Ct值和扩增曲线线型。
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三、RT-PCR检测试剂盒：Hifair?VnCovMultiplexOneStepRT-qPCRProbeKit至此，即开发出基于多重荧光RT-PCR原理，可以以冠状病毒RNA为模板进行多重定量PCR反应的定量试剂，并作为新型冠状病毒核酸检测试剂盒的核心组分，用于试剂盒组装。产品信息
搭配UDGase/dUTP，可预防气溶胶污染，产品如下：
公司介绍
上海翊圣生物科技有限公司（YeasenBiotechCo.,Ltd）成立于年，是国家高新技术型企业，致力于成为国内分子酶产业创新领导者。
翊圣生物通过打造先进的分子酶双向技术平台、大规模蛋白发酵纯化技术平台、高效抗体筛选技术平台，目前已成功开发各类诊断分子酶、二代测序建库酶等40余种，并实现工业放大。翊圣生物开发的PCR类、NGS类、体外诊断（IVD）和相关酶原料等产品获得了广大客户的认可。此外，我们还为工业客户提供定制化开发服务，以满足个性化需求。
未来，翊圣生物将进一步深化分子酶产业的创新发展，建立创新中心和更高规模生产基地，强化在临床分子诊断、高通量测序、细胞治疗等领域上游的布局，通过全套及个性化产品，为下游客户提供完美解决方案，为中国精准医疗的发展贡献自己的力量。
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